では,高速液体クロマトグラフィー(HPLC)はどのような構造になっているんでしょう??
〜装置の構造〜
<HPLC装置の典型的な構成>
CC 表示-継承 3.0 / File:Chromatography tank.png
アップロード者: Hazard-SJ / Wikipedia
(A:溶媒 B:2溶媒切り替えバルブ D:圧力ダンパー E:ミキサー H:HPLCコントローラー J:検出データA/D変換装置 K:PC L:プリンター)
HPLCの装置は主に
①ポンプ(C)
②注入器(オートサンプラー)(F)
③カラム(G) と カラムオーブン
④検出器(I)
の4つにわけることができます!
それぞれを簡単に解説していきます♪
《1. ポンプ》
液体クロマトグラフィーの心臓部ともいえます...!
移動相である溶離液を圧をかけてカラムに送液します.一定の量を正確に送ることが重要です.
《2. オートサンプラー》
測定したい試料を注射器で吸い取り,カラムに注入する装置です.こちらも正確に量を吸い取ることが重要です..!
《3-1. カラム》
細い金属の棒のように見えますが、実際にクロマトグラフィーを行う場所です!!
☝カラムの内部構造
カラムの中には,小さな充填剤(=固定相)がたくさん入っています.
分子の大きさで分ける充填剤,陰or陽イオンと引き合う充填剤...などなど
何を分離したいか、どの分離方法を用いるかによって使うカラムも変わってきます.
さらに、カラムの長さ、カラムの内径、充填剤の大きさによって分離能力が変わってきます…しっかりとカラムの特徴を知ることが重要です☆
《3-2. カラムオーブン》
カラムを入れておく場所なのですが,カラムの温度を一定に保つことが出来ます!
また分離したい成分によっては、高温状態のほうが分離しやすいものもあるので、カラムに温度をかけるために使ったりもします!
《4. 検出器》
カラムによって分離された成分の結果を、電気信号として取り出します.
検出方法によって、さまざまな検出器があります.
(主な検出器)
・紫外吸収検出器:測定波長を当て,吸光度から定量します.
・示差屈折率検出器:溶液の屈折率が変化することを利用します.
・電気伝導度検出器:イオンによって上昇する溶離液の導電率を測定します.
・蛍光検出器:紫外線を照射して成分の蛍光エネルギーを測定します.
英語ですが、HPLCの簡単な説明の動画です!
また途中には、「ペーパークロマトグラフィ」の様子も映っているので是非見てみてください( `ー´)ノ
(ペーパークロマトグラフィー:「高速液体クロマトグラフィーとは」→「”クロマトグラフィー”について」で説明)